
實驗材料:
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml燒杯2個;
3、50ml離心筒2個
4、培養皿1個,細胞培養瓶1個
5、1ml ,200μl移液器各1支;槍頭盒2個;無菌玻璃攪拌棒1個
6、細胞計數板1塊;
7、滅好菌的鑷子1把,剪刀1把;
8、酒精燈1臺;
產品名稱 |
規格 |
貨號 |
DU145[DU-145]細胞 |
詳見說明書 |
FS-X5411 |
產品名稱:前列腺癌細胞
來源:BSL-1
培養基:DMEM高糖90%,胎牛血清10%(1521/1531)
狀態:上皮細胞
公司細胞現貨供應,質量有保證、價格優惠、實驗效果好,我司為您提供免費代測服務,同時提供新價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明。
凍存培養基:
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養基。凍存培養基中應含有DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的完全凍存培養基。
1)細胞凍存培養基是一種用于哺乳動物細胞的即用型完全凍存培養基,其所含胎牛血清和牛血清比例經過優,可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。
2)凍存培養基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養基,含10% DMSO,適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養細胞凍存方案:
以下實驗方案介紹了培養細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案,必須參閱針對具體細胞的產品說明書。
1.配制凍存培養基,于2°C至8°C下儲存,直至使用。請注意使用何種凍存培養基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時,利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養容器上脫離下來。用該細胞所需完全培養基重新懸浮細胞。
3.采用血球計數器、細胞計數儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數儀測定總細胞數和活細胞百分比。根據所需活細胞密度,計算凍存培養基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液,不要攪動細胞沉淀。
注:離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養基重新懸浮細胞沉淀,將其調整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時,應不時輕輕混合細胞,使其保持均勻的細胞懸液狀態。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞,使溫度每分鐘大約降低1°C?;蛘?,將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中,然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。
鹽酸藥根堿(標準品)英文名稱: L-Lysine methyl ester dihydrochloride同源盒蛋白C6抗體包裝10g
鹽酸伊立替康(標準品)英文名稱: L-Methionine Methyl Ester Hydrochloride同源盒蛋白C4抗體包裝10mg
鹽酸益母草堿(標準品)英文名稱: Sodium cholesteryl sulfate同源盒蛋白D13抗體包裝50mg
鹽酸育亨賓(標準品)英文名稱: O-tert-Butyl-L-serine methyl ester hydrochloride組蛋白H1.4樣蛋白抗體包裝5g
羊膽粉(標準品)英文名稱: L-Valine methyl ester hydrochloride 組蛋白H1FOO抗體包裝1g
羊耳菊(標準品)英文名稱: L-Valinamide hydrochloride 同源盒蛋白B6抗體包裝1g
羊開口(標準品)英文名稱: Cysteamine Hydrochloride錯構素蛋白抗體包裝25g
羊奶奶葉(標準品)英文名稱: Glycinamide hydrochloride磷酸化組蛋白H1FOO抗體包裝5g
楊梅苷(標準品)英文名稱: L-4-Hydroxyproline methyl ester hydrochloride單純皰疹病1型轉錄調節因子ICP22抗體包裝100g
楊梅素-3-O-半乳糖苷英文名稱: D-Leucine methyl ester hydrochlorideH2A組蛋白家族E蛋白抗體包裝25g
楊梅素/楊梅酮(標準品)英文名稱: (s)-2-phenylglycine methyl ester hydrochlorideH2B組蛋白家族M蛋白抗體包裝500g
楊芽黃素(標準品)英文名稱: H-D-Ala-OEt·HClH2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(特異性)包裝1g
洋艾素(標準品)英文名稱: LinagliptinPWWP域包含蛋白1抗體包裝5g
洋川芎內酯A(標準品)英文名稱: L-Glutamic Acid 1-Benzyl Ester高密度脂蛋白抗體包裝5g
洋川芎內酯H(標準品)英文名稱: H-Leu-OEt·HClHEAT重復內含蛋白1蛋白抗體包裝100g
DU145[DU-145]細胞泡盛曲霉Human PRSS1(Trypsin-1) ELISA KitAlias: PRSS1(Protease|Serine|1)|PTRYI|TRY4|Trygn16|Trypsinogen1|Beta-trypsin|Cationictrypsinogen|digestivezymogen|nonfunctionaltrypsin1|protease|serine|1(trypsin1)|Serineprotease1|TRP1|TRY1|TRYP1|TrypsinI|trypsin-1|trypsinogen1|trypsinogenAELISAKitReactivity: Human
枯草芽孢桿菌Human NTN4(Netrin-4) ELISA KitAlias: NTN4(Netrin4)|beta-Netrin|Netrin-4|CDY|CDY1A|chromodomainprotein|Ychromosome|1|chromodomainprotein|Y-linked|1|testis-specificchromodomainproteinonY|testis-specificchromodomainproteinY1|Hepar-derivednetrin-likeproteinELISAKitReactivity: Human
漢遜德巴利酵母漢遜變種Human NTN1(Netrin-1) ELISA KitAlias: Ntn1(Netrin1)|netrin-1|Lnetrin1|Mouse|homologofELISAKitReactivity: Human
不解糖鞘氨醇單胞菌Human PRSS1(Trypsin-1) ELISA KitAlias: PRSS1(Protease|Serine|1)|PTRYI|TRY4|Trygn16|Trypsinogen1|Beta-trypsin|Cationictrypsinogen|digestivezymogen|nonfunctionaltrypsin1|protease|serine|1(trypsin1)|Serineprotease1|TRP1|TRY1|TRYP1|TrypsinI|trypsin-1|trypsinogen1|trypsinogenAELISAKitReactivity: Human
Human APOA5(Apolipoprotein A-V) ELISA KitAlias: APOA5(ApolipoproteinA-V)|APOAV|RAP|Apo-AV|ApoA-V|ApolipoproteinA5|RegeneRation-associatedprotein3ELISAKitReactivity: Human
棒曲霉Human NMU(Neuromedin-U) ELISA KitAlias: NMU|Neuromedin-UELISAKitReactivity: Human
麻臉蘑菇Human NTN4(Netrin-4) ELISA KitAlias: NTN4(Netrin4)|beta-Netrin|Netrin-4|CDY|CDY1A|chromodomainprotein|Ychromosome|1|chromodomainprotein|Y-linked|1|testis-specificchromodomainproteinonY|testis-specificchromodomainproteinY1|Hepar-derivednetrin-likeproteinELISAKitReactivity: Human
杏鮑菇Human IL2RB(Interleukin-2 receptor subunit beta) ELISA KitAlias: IL-2Rβ(Interleukin2ReceptorBeta)|IL2RB|CD122|IL-15Rbeta|CD122antigen|highaffinityIL-2receptorbetasubunit|HighaffinityIL-2receptorsubunitbeta|IL-2receptorsubunitbeta|IL-2Rsubunitbeta|IL-2RB|interleukin15receptor|beta|interleukin2receptor|beta|interleukin-2receptorsubunitbeta|p70-75|P70-75|p75ELISAKitReactivity: Human
細胞培養操作規程:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。